ilvmНормативно-правовое регулирование в ветеринарииLegal regulation in veterinary medicine2782-6252SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2782-6252.2022.3.33ilvm-402Research ArticleРЕЗУЛЬТАТЫ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ В ВЕТЕРИНАРИИ. ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИRESULTS OF SCIENTIFIC RESEARCH IN VETERINARY MEDICINE: INFECTIOUS DISEASESДетекция энтеробактерий с применением полимеразной цепной реакции в режиме реального времениDetection of enterobacteria using polymerase chain reaction real-timehttps://orcid.org/0000-0001-5435-8321МакавчикС. А.MakavchikS. A.

Макавчик Светлана Анатольевна, доктор ветеринарных наук, доцент

Svetlana A. Makavchik, Dr.habil of Veterinary Sciences, Docent

ВоробьеваЕ. Д.VorobievaE. D.

Воробьева Елизавета Дмитриевна, студент

Elizaveta D. Vorobieva, student

ТравинаВ. B.TravinaV. V.

Травина Валерия Вячеславовна, студент

Valeria V. Travina, student

Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медициныРоссияSt. Petersburg State University of Veterinary MedicineRussian Federation202218102022033335Copyright © Макавчик С.А., Воробьева Е.Д., Травина В.B., 20222022Макавчик С.А., Воробьева Е.Д., Травина В.B.Makavchik S.A., Vorobieva E.D., Travina V.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://ilvm.elpub.ru/jour/article/view/402

Цель работы провести полимеразную цепную реакцию в режиме реального времени для выделения энтеробактерий из фекалий маисового полоза и их идентификации.

Отобраны фекальные массы после линьки у самца маисового полоза по кличке Кролик морфы Bloodred het Pied-Sided. Дата выхода из яйца: 19.06.2020.

Выделение нуклеиновых кислот из образцов фекалий проводили с использованием комплекта реагентов «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ» (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии) в соответствии с инструкцией производителя.

Для проведения амплификации применяли тест – систему «Сальм-ИДС» для выявления патогенных сальмонелл (Samonella spp et Salmonella Typhi). Процесс амплификации проводили в приборе для ПЦРРВ LightCicler 96 (Roche).

При исследовании фекалий от пресмыкающего молекулярным методом обнаружен род Salmonella. ПЦР-исследование не позволило  провести видовую идентификацию  и определить жизнеспособность микроорганизма, то необходимо создание схемы лабораторного контроля сальмонелезной инфекции, которая будет включать как ПЦР, так и бактериологические исследования.

The purpose of the work is to carry out a real-time polymerase chain reaction for the isolation of enterobacteria from the faeces of the maize snake and their identification.

Fecal masses after molting were collected from a male maize snake named Rabbit of Bloodred het Pied-Sided morph.

Egg release date: 06/19/2020.

Isolation of nucleic acids from faecal samples was carried out by the sorption method using the AmpliPrime DNA-sorb

-AM reagent kit (Central Research Institute of Epidemiology) in accordance with the manufacturer's instructions.

For amplification, a test was used the Salm-IDS system for the detection of pathogenic Salmonella (Samonella spp et Salmonella Typhi). The amplification process was carried out in a LightCicler 96 (Roche) PCR-RT instrument.

In the study of feces from a reptile by the molecular method, the genus Salmonella was discovered.

The PCR study did not allow for species identification and determination of the viability of the microorganism, it is necessary to create a scheme for laboratory control of salmonella infection, which will include both the PCR method and bacteriological studies.

энтеробактерииПЦР в режиме реального временидетекцияидентификацияenterobacteriaPCR Real timedetectionidentification.ReferencesМакавчик, С.А. Лабораторные методы контроля полирезистентных возбудителей бактериальных болезней животных и рациональное применение антимикробных препаратов: монография / С.А. Макавчик, А.А. Сухинин, С.В. Енгашев, А.Л. Кротова. – Санкт-Петербург: изд-во ВВМ, 2021 г. – 152 с.: ил.Makavchik, S.A. Laboratory methods for the control of multiresistant pathogens of bacterial animal diseases and the rational use of antimicrobial drugs: monograph / S.A. Makavchik, A.A. Sukhinin, S.V. Engashev, A.L. Krotov. St. Petersburg: VVM publishing house, 2021 152 p.: ill.Макавчик, С.А. Эффективность определения Mycoplasma bovis в молоке коров при маститах с использованием полимеразной цепной реакции в режиме реального времени на микрочипе с лиофилизированными тест-системами/Макавчик С.А.// Международный вестник ветеринарии. 2019.№ 2.С. 11-16.Makavchik, S.A. Efficiency of detection of Mycoplasma bovis in milk of cows with mastitis using real-time polymerase chain reaction on a microchip with lyophilized test systems / Makavchik S.A. // International Veterinary Bulletin. 2019.No. 2.S. 11-16.Понамарёв, В.С. Полимеразная цепная реакция с электрофоретической детекцией продуктов амплификации /Понамарёв В.С., Макавчик С.А.// Молодежный научный форум: естественные и медицинские науки.2016. -№ 10 (38).С. 148-152.Ponamarev, V.S. Polymerase chain reaction with electrophoretic detection of amplification products /Ponamarev V.S., Makavchik S.A. // Youth Scientific Forum: Natural and Medical Sciences. 2016. No. 10 (38). P. 148-152.Сухинин, А.А. Применение полимеразной цепной реакции в молекулярной диагностике инфекционных болезней животных / Сухинин А.А., Макавчик С.А., Прасолова О.В., Виноходова М.В.// Учебное пособие.— СПб.: Изд-во ФГБОУ ВО СПБГАВМ, 2017,— 96 с.Sukhinin, A.A. The use of polymerase chain reaction in the molecular diagnosis of infectious animal diseases / Sukhinin A.A., Makavchik S.A., Prasolova O.V., Vinokhodova M.V. 2017, 96 p.Сухинин, А.А. Положительные и отрицательные аспекты диагностического использования мультиплексной полимеразной цепной реакции в реальном времени (Real time PCR) / Сухинин А.А., Макавчик С.А., Прасолова О.В.// Международный вестник ветеринарии. 2016. № 1. С. 41-45.Sukhinin, A.A. Positive and negative aspects of the diagnostic use of real-time multiplex polymerase chain reaction (Real-time PCR) // Sukhinin A.A., Makavchik S.A., Prasolova O.V. International Bulletin of Veterinary Medicine. 2016. No. 1. S. 41-45.Сухинин, А.А. Мультиплексная ПЦР в реальном времени, как экспресс-метод лабораторной диагностики инфекционных болезней животных / Сухинин А.А., Макавчик С.А., Прасолова О.В.// В книге: Новые методы экспресс-диагностики микроорганизмов в медицине, фармации, ветеринарии и экологии. Сборник материалов.2015.С. 253-254.Sukhinin, A.A. Multiplex real-time PCR as an express method for laboratory diagnosis of infectious animal diseases / Sukhinin A.A., Makavchik S.A., Prasolova O.V. // In the book: New methods of express diagnostics of microorganisms in medicine, pharmacy, veterinary medicine and ecology. Collection of materials. 2015. S. 253-254.Сухинин, А.А. Полимеразная цепная реакция для выявления Ureaplasma diversum у крупного рогатого скота / Сухинин А.А., Макавчик С.А., Смирнова Л.И., Приходько Е.И. // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии.2017.№ 1. -С. 45-47.Sukhinin, A.A. Polymerase chain reaction for the detection of Ureaplasma diversum in cattle / Sukhinin A.A., Makavchik S.A., Smirnova L.I., Prikhodko E.I. // Issues of legal regulation in veterinary medicine.2017.No. 1. -S. 45-47.Сухинин, А.А. Практикум по общей ветеринарной микробиологии / Сухинин А.А., Тулева Н.П., Белкина И.В., Смирнова Л.И, Бакулин B.А., Приходько Е.И., Макавчик С.А., Виноходов В.О // Санкт-Петербургский политологический журнал. 2016.С. 100.Sukhinin, A.A. Workshop on General Veterinary Microbiology/ Sukhinin A.A., Tuleva N.P., Belkina I.V., Smirnova L.I., Bakulin V.A., Prikhodko E.I., Makavchik S.A., Vinokhodov V.O. // St. Petersburg Journal of Political Science. 2016. P. 100.Сулян, О.С. Ассоциированная устойчивость к полимиксину и бета-лактамам Escherichia coli, выделенных от людей и животных / Сулян О.С., Агеевец В.А., Сухинин А.А., Агеевец И.В., Абгарян С.Р., Макавчик С.А., Каменева О.А., Косякова К.Г., Мругова Т.М., Попов Д.А., Пунченко О.Е., Сидоренко С.В. // Антибиотики и химиотерапия. 2021. Т. 66. № 11-12.С. 9-17.Sulyan, O.S. Associated resistance to polymyxin and Escherichia coli beta-lactams isolated from humans and animals Sulyan O.S., Ageevets V.A., Sukhinin A.A., Ageevets I.V., Abgaryan S.R., Makavchik S.A., Kameneva O.A., Kosyakova K.G., Mrugova T .M., Popov D.A., Punchenko O.E., Sidorenko S.V. // Antibiotics and chemotherapy. 2021. T. 66. No. 11-12.S. 9-17.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.