Диагностическая эффективность рабического антигена для индикации поствакцинальных антител

Целью настоящего исследования явилась оценка диагностической эффективности выделенного рабического антигена для оценки напряжённости иммунитета у животных, вакцинированных против бешенства. В ходе исследования методами аналитического disc-электрофореза в 12,5% полиакриламидном геле и вестерн -блоттинга были проанализированы в сравнительном аспекте основные иммунохимические характеристики антигенных фракций вируса бешенства, выделенных в 15 - 50% ступенчатом градиенте плотности сахарозы, а также полученной при помощи переосаждения насыщенным раствором сульфата аммония. Было установлено, что основная мажорная фракция очищенного антигена расположена в области 66,2 - 67 кДа; также выделенный препарат характеризуется минимальным содержанием вторичных белков. В результате определения серологической активности антигенных фракций методом непрямого ИФА были установлены их оптимальные концентрации для сорбции на полистироловые планшеты. Всего было исследовано 90 сывороток иммунизированных КРС, МРС и собак, отобранных на территориях неблагополучных по бешенству районов республик Татарстан, Башкортостан, а также Кировской области РФ. В результате исследования сывороток в нИФА были определены титры поствакцинальных антител, соответствующие диапазону 1,25-20 МЕ/мл; в 97,7% сывороток уровень антител превышал рекомендованный протективный уровень (0,5 МЕ/ мл). В качестве контрольного теста использовали реакцию нейтрализации на белых мышах; при сопоставлении результатов РН и нИФА была выявлена значительная положительная корреляция. Полученные результаты свидетельствуют о высокой диагностической эффективности исследуемых антигенных фракций и перспективности их использования в целях массового скрининга состояния специфического иммунитета у вакцинированных животных.

антиген вируса бешенства, серодиагностика, иммуноферментный анализ, rabies virus antigen, serodiagnosis, ELISA

1. Гулюкин, А. М. Изучение иммунного статуса организма собак, вакцинированных против бешенства / А. М. Гулюкин, Н. А. Хисматуллина, А. З. Гафарова и др. // Учёные записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. - 2012. - Т. 211. - С. 52-56.

2. Елаков, А. Л. Меры борьбы с бешенством у безнадзорных диких животных / А. Л. Елаков // VetPharma. - 2013. - № 5(6). - С. 24-27.

3. Ефимова М.А. Выделение, очистка и оценка серологической активности антигенов вируса бешенства / М.А. Ефимова, К.С. Хаертынов, A.Ф. Арсланова и др. // Проблемы особо опасных инфекций. - 2017. - №4. - C. 27-30.

4. Пухова, Н. М. Антирабическая референс-вакцина / Н. М. Пухова, А. Я. Самуйленко, В. И. Еремец и др. // Учёные записки УО ВГАВМ. - 2011. - Т. 47, В. 2., Ч. 1. - С. 76-78.

5. Хисматуллина, Н. А. Разработка и применение блок-иммуноферментной тест-системы для контроля эффективности вакцинопрофилактики бешенства / Н. А. Хисматуллина, А. М. Гулюкин, B. В. Сабирова и др. // Ветеринарна медицина. - 2012. - № 96. - С. 64-66.

6. Ghosh, R. The necessity of and strategies for improving confidence in the accuracy of western blots / R. Ghosh, J. E. Gilda, A. V. Gomes // Expert Review of Proteomics. - 2014. - Vol. 11 (5). - P. 549-560.

7. Wu, X. One-step casting of Laemmli discontinued sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis gel / X. Wu, H. Koiwa // Analytical Biochemistry. - 2017. - Vol. 421 (1). - P. 347-349.