Особенности использования сыворотки крови КРС в технологии культивирования метапневмовируса птиц

При получении вируссодержащего материала метапневмовирусной инфекции птиц (МПВИ) на культуре клеток Vero особое внимание надо уделять составу ростовых и поддерживающих питательных сред, поскольку их компоненты непосредственно влияют на пролиферацию и жизнеспособность клеточной культуры, а, значит, и на качество получаемого целевого продукта.

Для культуры клеток Vero основной питательной средой является среда DMEM, в которую вносят различные дополнительные компоненты. В ростовую среду принято вносить до 10% фетальной бычьей сыворотки (ФБС). Что касается поддерживающей среды, то вопрос необходимости внесения в неё сыворотки крови крупного рогатого скота (КРС) не имеет однозначного решения. Поскольку финансовые затраты на питательные среды оказывают существенное влияние на себестоимость конечной продукции, то необходимо анализировать экономическую целесообразность использования того или иного компонента, в связи с чем нами была изучена роль сыворотки крови КРС (ФБС и сыворотки крови КРС) в технологии получения вируса МПВИ.

В результате проведенных исследований было выявлено, что в ростовой среде для культуры клеток Vero можно заменить ФБС на сыворотку крови КРС при проведении не более чем двух последовательных пересевов. Однако если культура клеток Vero будет пересеваться более двух раз, то такая замена невозможна, поскольку уже в 3-4 пассаже наблюдаются признаки снижения скорости деления клеток и дегенерации клеточной культуры. В клеточном слое отмечается большое количество пустот и округлившихся клеток, что делает невозможным его использование для культивирования вирусов или дальнейшего пересева.

Также было установлено, что при культивировании вируса МПВИ на культуре клеток Vero оптимальной для использования является поддерживающая среда DMEM, содержащая 2% сыворотки крови КРС, поскольку она обеспечивает получение вируссодержащего материала с более высокой инфекционной активностью, по сравнению со средой DMEM, которая вообще не содержит или содержит 10 % сыворотки крови КРС. 

1. Панкратов С. В. Метапневмовирусная инфекция птиц / С. В. Панкратов, С. Р. Абгарян // Нормативно-правовое регулирование в ветеринарии. – 2022. – № 3. – С. 36-39.

2. Никитина Н. В. Выделение метапневмовируса птиц на различных биологических системах / Н. В. Никитина, С. Р. Абгарян // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. – 2019. – № 2. – С. 34-36.

3. Норкина С. Н. Профилактика метапневмовирусной инфекции птиц / Т. Н. Рождественская, И. П. Николаева [и др.] // Птица и птицепродукты. – 2022. – № 4. – С. 52-55.

4. Респираторный синдром птиц. Этиология, диагностика, меры борьбы и профилактики / С. В. Панкратов, Т. Н. Рождественская, А. А. Сухинин, А. В. Рузина //. – 2021. – № 4. – С. 34-36.

5. Макавчик С. А. Колибактериоз птиц: особенности экспресс - диагностики, профилактики и лечения: специальность 16.00.03: автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Макавчик Светлана Анатольевна. – Санкт-Петербург, 2007. – 19 с.

6. Герасимова Н. И. Разработка лабораторного способа поддержания перевиваемых культур клеток СПЭВ, GH-91, Vero / Герасимова Н. И., Старов С. К., Герасимов В. Н. // Ветеринарная патология. – 2006. – № 4(19). – С. 168-170.

7. Сухинин А.А. Лабораторная диагностика вирусных болезней: учебное пособие / А.А. Сухинин – СПб.: СПбГАВМ, 2019. – 124 с.