Применение Амоксициллина в постановке теста «Жемчужное ожерелье» при идентификации возбудителя сибирской язвы

Идентификация возбудителя сибирской язвы является составной частью диагностики вызываемого им заболевания, которое ежегодно регистрируется на территории нашей страны среди животных и людей. Согласно методическим указаниям по диагностике возбудителя сибирской язвы, одним из идентификационных тестов является изучение чувствительности возбудителя к пенициллину с регистрацией феномена жемчужного ожерелья. В настоящее время соли пенициллина являются труднодоступным антибактериальным препаратом. Исходя из этого, нами был применен амоксициллин - антибиотик пенициллинового ряда, обладающий аналогичным механизмом действия, что и явилось целью нашего исследования. Питательную среду с антибиотиком готовили по аналогии со средой с добавлением пенициллина, согласно МУК 4.2.2413-08. В качестве антибактериального препарата использовали амоксициллин в форме амоксициллина тригидрата производства Hemofarm (Сербия). Для работы амоксициллин по аналогии с пенициллином разводили в 1 000 000 раз стерильным бульоном Хоттингера и вносили в подготовленную питательную среду. Петлю выросшей суточной культуры штамма КСТИ-79 B. anthracis засевали в 3 мл приготовленной среды и икубировали в течение 3-х часов при 37 ° С. В течение времени инкубации из клеток готовили мазки и окрашивали по Ребигеру. Мазки готовили через 15, 30 минут и через 1, 2 и 3 часа. В результате проведенной работы было установлено, что использование амоксициллина при идентификации B. anthracis позволяет получить необходимые результаты c характерной картиной «жемчужного ожерелья». При этом была изучена динамика изменения морфологии клеток, подвергнутых инкубации в питательной среде, содержащей амоксициллин. Установлено, что изменение клеточной стенки и формы клетки можно наблюдать уже через 15 минут инкубации. Через 1 час клетки претерпевали значительную деформацию с появлением большого числа отдельных шарообразных клеточных форм. Через 2 часа инкубации цепочки B. anthracis начали приобретать характерный вид жемчужного ожерелья, который прослеживался и спустя 3 часа.

1. Евстифеев В.В. Биологические свойства нового изолята хламидий, выделенного от абортировавшей козы / В.В. Евстифеев, Ф.М. Хусаинов, С.И. Яковлев, Г.И. Хусаинова // Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства. – 2020. - №22. – С. 432-435.

2. Егоров А.М. Ингибиторы β-лактамаз. Новая жизнь βлактамных антибиотиков / А.М. Егоров, М.М. Уляшова, М.Ю. Рубцова // Биохимия. - 2020. - №11. - С. 1519-1539.

3. Иванова С.В. Изучение биологических свойств Burkholderia pseudomallei после длительного хранения / С.В. Иванова, Л.А. Мельникова, Х.Н. Макаев // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. – 2018. – Т. 16. – С. 466-474.

4. Косарев М.А. Изучение культурально-морфологических свойств бруцелл вида abortus, находящихся в различной степени диссоциации / М.А. Косарев, А.М. Фомин, Г.М. Сафина и др. // Ветеринарный врач. – 2018. - №4. – С. 14-18.

5. Лабораторная диагностика и обнаружение возбудителя сибирской язвы: Методические указания. – М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2009. – 69 с.

6. Маринин Л.И. Характеристика культур, выделенных из почвы старого сибиреязвенного скотомогильника / Л.И. Маринин, Н.А. Шишкова, А.Н. Мокриевич, И.А. Дятлов // Бактериология. – 2022. - №1. – С. 40-46.

7. Павлов Д.Л. Результаты исследования биологических и генетических свойств сибиреязвенных изолятов эпизоотии 2016 года в Ямало-Ненецком автономном округе / Д.Л. Павлов, Н.В. Онучина, А.В. Кузнецовский и др. // Вестник войск РХБ защиты. – 2017. - №1. – С. 23-32.

8. Родионов А.П. Динамика популяций Т- и Влимфоцитов в крови крупного рогатого скота, вакцинированного против сибирской язвы / А.П. Родионов, С.В. Иванова // В сб.: Сб. мат. X Международной научно-практической конференции «Инновационные технологии в АПК: теория и практика». - Пенза, 2022. - С. 159-162.

9. Родионов А.П. Динамика функциональной активности фагоцитарных клеток животных, вакцинированных против сибирской язвы / А.П. Родионов, С.В. Иванова, Л.А. Мельникова // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. – 2020. - №4. – С. 53-56.

10. Рубленко И.А. Определение биологических свойств вакцинного штамма Bacillus anthracis / И.А. Рубленко // Ученые записки УО ВГАВМ. – 2017. - №4. – С. 50-54.

11. Спиридонов А.Г. Биологические свойства бактерий Clostridium perfringens, выделенных в регионе среднего Поволжья от больных анаэробной энтеротоксемией телят / А.Г. Спиридонов, А.Ф. Махмутов, Г.Н. Спиридонов и др. // Ветеринарный врач. – 2022. - №1. – С. 41-46.

12. Уварова Ю.Е. Комплексный метод таксономической идентификации микроорганизмов / Ю.Е. Уварова, А.В. Брянская, А.С. Розанов и др. // Вавиловский журнал генетики и селекции. - 2020. - №4. - С. 376-382.

13. Montanari G. Morphological and phenotypical characterization of Bacillus sporothermodurans / G. Montanari, A. Borsari, C. Chiavari et al. // J Appl Microbiol. - 2004. - №4. - Р. 802-809.

14. Zasada A.A. Detection and Identification of Bacillus anthracis: From Conventional to Molecular Microbiology Methods / A.A. Zasada // Microorganisms. - 2020. - №1. - Р. 125.